Diagnosi avanzata dei patogeni della mastite + antibiogramma

Identifica il patogeno dell'infezione e scegli una terapia efficace basata su risultati accurati.

Quando è necessario sapere con cosa trattare realmente

Il trattamento mirato inizia da una diagnosi precisa

ClearMilk fornisce rapidamente un'informazione importante: indica se il campione di latte è batteriologicamente positivo e, in caso affermativo, quale specie di patogeno causa la mastite. Aiuta così a individuare quarti mammari, animali o gruppi di animali problematici.

Per decidere la terapia antibiotica è tuttavia fondamentale conoscere la sensibilità dell'agente patogeno ai singoli antibiotici. La coltura e il successivo antibiogramma in laboratorio aiutano a scegliere il trattamento più appropriato, a limitare l'uso inutile di antibiotici e a ridurre il rischio di sviluppo della resistenza antimicrobica.
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Tre servizi in un unico pacchetto

Coltura e identificazione

Coltura microbiologica classica su agar cromogeni in combinazione con il test ClearMilk in azienda. Identifichiamo:
  • Batteri Gram-positivi - Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Streptococcus uberis, S. agalactiae, S. dysgalactiae
  • Batteri Gram-negativi - E. coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter, Pseudomonas aeruginosa
  • Lieviti e alghe - Candida spp., Prototheca spp.
Identificazione MALDI-TOF consente di determinare con precisione la specie del patogeno (fino al livello di sottospecie) in pochi minuti. Risultato entro 24–48 ore dal ricevimento del campione.

Antibiogramma - sensibilità a oltre 12 antibiotici

Dopo l'isolamento del patogeno eseguiamo un antibiogramma con metodo di diffusione su disco (metodo Kirby-Bauer) utilizzando un pannello di antibiotici rilevanti per la pratica veterinaria nella Repubblica Ceca. Per ogni antibiotico il risultato è:
  • S - sensibile (il farmaco alla dose standard elimina il patogeno)
  • I - intermedio (è necessaria una dose più elevata o un trattamento prolungato)
  • R - resistente (non può essere utilizzato, cerchiamo un'alternativa)
I pannelli testati comprendono le categorie C e D secondo il regolamento UE 2019/6 (scelta preferenziale nella pratica veterinaria): penicilline, cefalosporine di 1ª–2ª generazione, aminoglicosidi, tetracicline, macrolidi e altri. La categoria B (cefalosporine di 3ª–4ª generazione, fluorochinoloni) viene testata solo nei casi indicati.

Diagnostica PCR

Per risultati rapidi (entro 6 ore) o per patogeni difficili da coltivare offriamo la diagnostica PCR. Applicazioni principali:
  • Mycoplasma bovis - non può essere coltivato con i metodi classici, la PCR è lo standard
  • Mastite clinica acuta - quando il tempo è determinante
  • Prima della messa in asciutta selettiva - screening rapido di grandi gruppi di vacche
  • Audit della mandria - verifica della presenza di patogeni specifici

Quando inviare un campione per l'analisi di laboratorio

L'analisi microbiologica del latte è indicata in queste quattro situazioni principali:

Prima della messa in asciutta della vacca

Se desiderate eseguire correttamente la messa in asciutta selettiva, dovete sapere quali vacche sono realmente infette. Senza la batteriologia decidete solo in base al CCS (conteggio delle cellule somatiche) - e questo non è sufficiente.

Raccomandazione: prelevare un campione 3–4 giorni prima della messa in asciutta programmata di ogni vacca con CCS superiore a 200.000 o con una storia di mastite.

Mastite ricorrente nella mandria

Se una vacca presenta 2 o più episodi clinici nella stessa lattazione, è molto probabile che:
  • Il patogeno sia resistente all'antibiotico scelto
  • Specie identificata in modo errato (ad es. confusione tra stafilococco e streptococco)
  • Infezione cronica (S. aureus, S. uberis)

CCS elevato nel latte di massa (>400.000)

Se il CCS nel latte di massa supera 400.000/ml, il caseificio riduce il prezzo di acquisto (–0,30 fino a –0,50 CZK/l) oppure rifiuta il latte. La causa è quasi sempre una mastite subclinica nella mandria, ma il patogeno non è noto.

L'analisi microbiologica del campione di latte di massa + il test mirato delle singole vacche con CCS elevato vi aiuteranno a individuare la fonte del problema e a ridurre il CCS. Maggiori informazioni nella sezione Come ridurre il CCS nel latte.

La mandria non risponde all'antibiotico scelto

Se il trattamento standard (ad es. una cefalosporina di 1ª generazione per la mastite acuta) non funziona in più di un caso, è altamente probabile la presenza di resistenza nella vostra mandria. Un antibiogramma regolare (4 volte l'anno) permette di individuare tempestivamente le tendenze, prima che il trattamento fallisca ripetutamente.

Procedura: come prelevare il campione e cosa fare dopo

Prelievo del campione di latte

  1. Etichettate il campione (vacca e quarto mammario)
  2. Pulite accuratamente il capezzolo con un panno umido, quindi asciugatelo
  3. Disinfettate l'estremità del capezzolo con un tampone disinfettante (per 30 secondi)
  4. Scartate i primi 4–5 getti di latte in un recipiente con fondo nero
  5. Riempite una provetta sterile con 5–10 ml di latte, evitando che l'apertura della provetta tocchi il capezzolo
  6. Chiudete la provetta
  7. Conservate al fresco (4 °C) per un massimo di 24 ore prima della spedizione

Scelta del metodo - diagnostica in azienda o laboratorio

Identificazione del patogeno in azienda: test ClearMilk - piastra di Petri a tre settori, risultato in 22–26 ore direttamente presso la vostra azienda. Consente di identificare i principali patogeni con un'accuratezza prossima a quella della diagnostica di laboratorio.

Per la conferma definitiva della diagnosi + determinazione dell'antibiogramma: Inviate il campione al nostro laboratorio. Otterrete l'identificazione precisa della specie (MALDI-TOF) e la sensibilità a oltre 12 antibiotici.

Invio al laboratorio

  • Trasporto refrigerato (contenitore termico con ghiaccio) - tramite corriere o trasporto
  • Allegate il modulo con l'identificazione dei campioni e i recapiti
  • Indirizzo: LabMediaServis s.r.o., Národní 84, 551 01 Jaroměř
  • Telefono per il coordinamento: +420 725 945 953, +420 720 930 872

Risultato

  • La coltura + MALDI-TOF: 24–48 ore dal ricevimento del campione
  • Antibiogramma: ulteriori 24 ore dopo l'isolamento
  • PCR: entro 6 ore per gli ordini urgenti
  • Risultato via e-mail con interpretazione e raccomandazione

Attrezzature e team

Il nostro team microbiologico vanta molti anni di esperienza nella diagnostica della mastite:

MVDr. Zuzana Čermáková, Ph.D.

Responsabile del laboratorio
Specializzazione in microbiologia clinica.

MVDr. Pavel Novotný

Responsabile del laboratorio
Supporta l'introduzione del sistema nelle aziende, l'interpretazione dei risultati e l'impostazione del trattamento e della prevenzione.
Maggiori informazioni sul laboratorio

Prezzo e disponibilità

ServizioTempo di refertazionePrezzo (indicativo)
Coltura + MALDI-TOF (1 campione)24–48 h350–600 CZK
Antibiogramma (1 isolato)+24 h120–240 CZK
Diagnostica PCR (1 campione)6 h600–900 CZK
Sconto per quantità maggiori (> 20 campioni)offerta personalizzata
Saremo lieti di concordare il prezzo specifico per la vostra azienda dopo il primo contatto: dipende dal volume, dalla frequenza e dalla combinazione dei servizi.
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Domande frequenti

L'antibiogramma è un test di laboratorio che determina la sensibilità di uno specifico patogeno isolato agli antimicrobici. A partire dall'isolato batterico, su una piastra di agar vengono applicati dischi standardizzati contenenti diversi antibiotici. Dopo l'incubazione si misura il diametro della zona di inibizione attorno a ciascun disco, determinando così se il batterio è sensibile (S), intermedio (I) o resistente (R) a uno specifico farmaco.

Dipende dall'obiettivo: nella diagnosi di mastite clinica o subclinica oppure in caso di risultato positivo durante i test prima della messa in asciutta, valutiamo se quel patogeno sia stato testato recentemente per la sensibilità. In caso contrario, prima di iniziare la terapia antibiotica eseguiamo sempre l'AST. Per monitorare le tendenze nella mandria, idealmente 4 volte l'anno testiamo un campione rappresentativo dei patogeni che ricorrono più frequentemente.

Coltura classica + MALDI-TOF: 24–48 ore dal ricevimento del campione. Antibiogramma: altre 24 ore dopo l'isolamento del patogeno (48–72 h in totale). Diagnostica PCR: 6 ore per gli ordini urgenti. Nei casi acuti, quando il tempo è determinante, la PCR è l'unica possibilità per un'identificazione rapida.

Procedura: pulire il capezzolo, disinfettare l'orifizio del canale del capezzolo, scartare 4–5 getti di latte, quindi riempire una provetta sterile con 5–10 ml. Prelevare sempre da un capezzolo disinfettato, senza contatto con superfici sporche. Conservare al fresco (4 °C) per un massimo di 24 ore. Un'igiene rigorosa durante il prelievo è fondamentale: un campione contaminato comporta un risultato errato e un trattamento inappropriato.

MALDI-TOF MS (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization - Time of Flight Mass Spectrometry) è un moderno metodo ad alta precisione per l'identificazione dei microrganismi, basato sullo spettro di massa delle proteine batteriche. A partire da una piccola quantità di coltura batterica, lo strumento identifica in pochi minuti la specie del patogeno con un'accuratezza superiore al 95%. È più rapido e preciso dei test biochimici classici.

La coltura fa moltiplicare i batteri in laboratorio su una piastra di agar: si ottiene una coltura viva che può essere sottoposta a test di sensibilità (antibiogramma). Richiede 24–48 h. La PCR rileva il DNA di patogeni specifici direttamente nel campione senza coltura: il risultato è disponibile in poche ore ed è adatta ai patogeni difficili da coltivare (Mycoplasma). La PCR è altamente sensibile, ma non consente di eseguire un antibiogramma (serve una coltura viva). Nella pratica combiniamo entrambi i metodi secondo necessità.

Scegliete un antibiotico indicato come S (sensibile) - idealmente un antibiotico di categoria D secondo il regolamento UE 2019/6 (penicilline, tetracicline) come prima scelta. Se più antibiotici risultano sensibili, la scelta va effettuata insieme al vostro veterinario in base a: disponibilità della forma farmaceutica (preparati intramammari vs sistemici), tempo di sospensione, costi ed esperienza precedente. Evitate i preparati indicati come R o I. In caso di dubbi sull'interpretazione, consultate il nostro specialista clinico, MVDr. Pavel Novotný.

Per lo screening della mandria consigliamo 10–20 campioni (in base alle dimensioni della mandria): vacche con CCS elevato, vacche con mastite clinica o subclinica negli ultimi 60 giorni, primipare nel periodo puerperale e alcune vacche scelte casualmente da diversi gruppi della mandria. È opportuno includere tutte le specie di patogeni presenti in azienda (se disponiamo dei dati). Saremo lieti di aiutarvi a predisporre un piano di campionamento specifico.

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